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/ Shareware Overload Trio 2 / Shareware Overload Trio Volume 2 (Chestnut CD-ROM).ISO / dir26 / med9409c.zip / M9490473.TXT < prev    next >
Text File  |  1994-09-19  |  3KB  |  47 lines
  1.        Document 0473
  2.  DOCN  M9490473
  3.  TI    Nucleolar protein B23: bacterial expression, purification,
  4.        oligomerization and secondary structures of two isoforms.
  5.  DT    9411
  6.  AU    Umekawa H; Chang JH; Correia JJ; Wang D; Wingfield PT; Olson MO;
  7.        Department of Biochemistry, University of Mississippi Medical; Center,
  8.        Jackson 39216-4505.
  9.  SO    Cell Mol Biol Res. 1993;39(7):635-45. Unique Identifier : AIDSLINE
  10.        MED/94332167
  11.  AB    Protein B23 is an abundant nucleolar phosphoprotein and putative
  12.        ribosome assembly factor. Two forms of the protein, B23.1 and B23.2,
  13.        contain 292 and 257 amino acids, respectively, and differ only in their
  14.        C-terminal sequences. The two B23 isoforms have been produced in
  15.        Escherichia coli using the pKK223-3 expression vector and purified to
  16.        near homogeneity. The purification utilized ammonium sulfate
  17.        fractionation followed by chromatography on DEAE-cellulose,
  18.        heparin-Sepharose and Bio-Rad Q. By combined gel filtration and
  19.        sedimentation analyses, both B23.1 and B23.2 formed multimers of Mr 210
  20.        to 255 kDa (apparent hexamers), suggesting that the differences in
  21.        C-terminal ends of of the isoforms do not affect oligomerization. The
  22.        oligomerization was not dependent on disulfide bond formation. The
  23.        circular dichroism spectra of recombinant proteins B23.1 and B23.2 were
  24.        similar suggesting that the carboxyl-terminal difference in the two
  25.        proteins does not markedly influence overall secondary structure. Using
  26.        routines for fitting the CD spectra to those of basis vectors the
  27.        recombinant B23 isoforms appeared to be composed predominantly of
  28.        beta-sheet and beta-turn secondary structures. Protein B23 from HeLa
  29.        cell nuclei was recently shown to have a high affinity for the HIV-1 Rev
  30.        protein. Using sucrose density gradient centrifugation it was shown that
  31.        both recombinant proteins B23.1 and B23.2, as well as B23.1 isolated
  32.        from Novikoff hepatoma nucleoli, were capable of binding the Rev
  33.        protein.
  34.  DE    Cell Nucleus/METABOLISM  Centrifugation, Density Gradient
  35.        Chromatography, Affinity  Chromatography, DEAE-Cellulose
  36.        Chromatography, Gel  Chromatography, Ion Exchange  Circular Dichroism
  37.        Cloning, Molecular/METHODS  Escherichia coli/*METABOLISM  Gene Products,
  38.        rev/METABOLISM  Hela Cells  Human  HIV-1/METABOLISM  Macromolecular
  39.        Systems  Nuclear Proteins/*BIOSYNTHESIS/*CHEMISTRY/ISOLATION & PURIF
  40.        Phosphoproteins/BIOSYNTHESIS/CHEMISTRY  Plasmids  *Protein Structure,
  41.        Secondary  Recombinant Proteins/*BIOSYNTHESIS/CHEMISTRY/ISOLATION &
  42.        PURIF  Restriction Mapping  Support, U.S. Gov't, P.H.S.  JOURNAL ARTICLE
  43.  
  44.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  45.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  46.  
  47.